İş inovasyonunu en üst düzeye çıkararak iş potansiyelinizi ortaya çıkarıyoruz.
Eposta GönderPeroksidaz, Peroxidase, Horseradish Peroxidase, HRP, 9003-99-0
Peroksidaz (Horseradish Peroxidase, HRP), hidrojen peroksit (H₂O₂) ve çeşitli elektron donörleri (fenoller, aromatik bileşikler, ABTS vb.) arasındaki oksidasyon reaksiyonlarını katalize eden bir oksidoredüktaz enzimidir. Yaban turpu (Armoracia rusticana) köklerinden elde edilen bu enzim, özellikle ELISA testlerinde sinyal üretimi olmak üzere analitik biyokimya alanında en yaygın kullanılan peroksidazdır. Ayrıca gıda endüstrisinde aroma geliştirme ve renk stabilizasyonu, biyosensörlerde H₂O₂ tayini ve çevre teknolojilerinde boya ile fenolik bileşiklerin oksidatif gideriminde kullanılır.
| Parametre | Bilgi |
|---|---|
| Ürün Adı | Peroksidaz (Horseradish Peroxidase, HRP) |
| Diğer Adları | Yaban Turpu Peroksidazı, HRP, Donör:Hidrojen Peroksit Oksidoredüktaz |
| CAS Numarası | 9003-99-0 |
| EC Numarası | 1.11.1.7 |
| Enzim Sınıfı | Oksidoredüktaz |
| Kaynak | Yaban turpu (Armoracia rusticana) kökleri veya rekombinant üretim (E. coli, maya vb.) |
| Görünüm | Kahverengimsi ila yeşilimsi kahverengi toz veya sıvı enzim preparatı |
| Koku | Hafif karakteristik koku |
| Fiziksel Hal (20°C) | Katı (toz) veya sıvı |
| Tür | Ad |
|---|---|
| Yaygın Adlar | Peroksidaz, Yaban Turpu Peroksidazı, HRP |
| Sistematik Ad | Donör:Hidrojen Peroksit Oksidoredüktaz |
| EC Numarası | 1.11.1.7 |
| CAS Numarası | 9003-99-0 |
| GTİP Kodu | 3507.90 |
Peroksidaz (HRP), moleküler ağırlığı yaklaşık 44 kDa olan monomerik bir glikoproteindir. Aktif bölgesinde hem grubu (demir protoporfirin IX) içerir ve bu kofaktör enzimin katalitik aktivitesi için kritik öneme sahiptir. HRP, 308 amino asit kalıntısından oluşur ve iki disülfit bağı ile stabilize edilir. Glikozilasyon oranı yaklaşık %18-22'dir.
Yapısal Özellikler:
Peroksidaz (HRP)
|
Glikoprotein (~44 kDa)
|
Hem kofaktörü (Fe-protoporfirin IX)
|
Aktif Bölge + Substrat Bağlanma Alanı
|
H₂O₂ + Elektron Donörleri (ABTS, Fenoller vb.)
| Özellik | Açıklama |
|---|---|
| Enzim Türü | Oksidoredüktaz |
| Kofaktör | Hem grubu (demir protoporfirin IX, Fe³⁺/Fe²⁺) |
| Moleküler Ağırlık | ~44 kDa (monomerik protein) |
| Amino Asit Sayısı | 308 kalıntı |
| Glikozilasyon | ~%18-22 (N-bağlı glikanlar) |
| İzoelektrik Nokta (pI) | 7.2 – 8.9 (izoenzime bağlı) |
| Substrat | H₂O₂ + elektron donörleri (ABTS, TMB, DAB, fenoller, guaiakol vb.) |
| Optimum pH | 5.0 – 7.0 |
| Optimum Sıcaklık | 30 – 40°C |
Peroksidaz, hidrojen peroksit (H₂O₂) ve çeşitli elektron donörleri arasındaki oksidasyon reaksiyonlarını katalize eder. Reaksiyon, enzimin hem demirinin oksidasyonu ile başlar ve iki aşamalı bir mekanizma ile ilerler.
Genel Reaksiyon:
H₂O₂ + AH₂ → 2H₂O + A
(Substrat: ABTS, TMB, Guaiakol, Fenoller, vb.)
Reaksiyon Mekanizması (Aşamalar):
HRP(Fe³⁺) + H₂O₂ → Kİ (HRP-Fe⁴⁺=O ·⁺) + H₂O (Bileşik I oluşumu)
Kİ (Bileşik I) + AH₂ → KII (Bileşik II) + AH· (1. elektron transferi)
KII (Bileşik II) + AH₂ → HRP(Fe³⁺) + AH· + H₂O (2. elektron transferi, rejenerasyon)
Not: AH₂ indirgenmiş elektron donörünü, AH· ise oksitlenmiş radikal ürünü temsil eder. Oluşan radikal ürünler, substrata bağlı olarak dimerizasyon, polimerizasyon veya ileri oksidasyon reaksiyonlarına girebilir.
| İzoenzim | pI | Katalitik Etkinlik | Açıklama |
|---|---|---|---|
| HRP C | ~7.2 | Yüksek | En yaygın ve en iyi karakterize edilmiş izoenzim |
| HRP A | ~5.5 | Orta | Asidik izoenzim |
| HRP B | ~8.9 | Düşük | Bazik izoenzim |
| HRP D | ~6.5 | Orta | Orta izoenzim |
Önemli Not: HRP C, ticari preparatlarda en yaygın bulunan izoenzimdir ve ELISA gibi diagnostik uygulamalarda tercih edilir.
| Özellik | Değer |
|---|---|
| Görünüm | Kahverengimsi ila yeşilimsi kahverengi toz veya sıvı |
| Koku | Hafif karakteristik koku |
| Çözünürlük | Suda ve seyreltik tuz çözeltilerinde çözünür |
| Optimum pH Aralığı | 5.0 – 7.0 |
| Etkili pH Aralığı | 4.0 – 9.0 |
| Optimum Sıcaklık | 30 – 40°C |
| Etkili Sıcaklık Aralığı | 15 – 50°C |
| Inaktivasyon Sıcaklığı | >60°C |
| Moleküler Ağırlık | ~44 kDa |
| İzoelektrik Nokta (pI) | 7.2 – 8.9 (izoenzime bağlı) |
| Stabilite | 4-8°C'de saklandığında 12 ay stabil |
| Parametre | Değer |
|---|---|
| Aktivite Tanımı | Bir birim (U), pH 7.0 ve 25°C'de dakikada 1 µmol ABTS (2,2'-azino-bis(3-etilbenzotiazolin-6-sülfonik asit)) substratının oksidasyonu için gerekli enzim miktarıdır (ε₄₂₀ = 36 mM⁻¹cm⁻¹). |
| Tipik Aktivite | Üreticiye göre değişir (tipik olarak 50 – 1.000 U/mg protein) |
| Substrat | H₂O₂ + elektron donörleri (ABTS, TMB, DAB, guaiakol, fenoller, o-dianisidin, vb.) |
| Reaksiyon Ürünleri | Oksitlenmiş substrat ürünleri (renkli veya floresan ürünler) + H₂O |
| Aktivatörler | Stabilizatörler (BSA, sükroz, gliserol) |
| İnhibitörler | Sodyum azid (NaN₃), ağır metaller (Cu²⁺, Hg²⁺, Pb²⁺), sülfürlü bileşikler, EDTA (yüksek konsantrasyon), detajanlar (SDS) |
| Substrat | Maksimum Absorpsiyon (λmaks) | Renk | Açıklama |
|---|---|---|---|
| TMB (3,3',5,5'-Tetrametilbenzidin) | 450 nm (acid) / 650 nm | Mavi → Sarı | ELISA'da en yaygın kullanılan substrat |
| ABTS | 420 nm | Yeşil | Kinetik ölçümler için uygundur |
| OPD (o-Fenilendiamin) | 490 nm | Turuncu-Sarı | Kanserojen riski nedeniyle az kullanılır |
| DAB (Diaminobenzidin) | 450 nm | Kahverengi | Histokimyada kullanılır |
| Guaiakol | 470 nm | Kahverengi | Klasik aktivite ölçümü |
| Adım | Açıklama |
|---|---|
| 1 | HRP, ELISA plakasında immobilize edilmiş antikora konjuge edilir. |
| 2 | Substrat çözeltisi (H₂O₂ + TMB/ABTS) eklenir. |
| 3 | HRP, H₂O₂'yi kullanarak substratı okside eder. |
| 4 | Oksidasyon reaksiyonu sonucunda renkli ürün oluşur. |
| 5 | Renk oluşumu, enzimin (dolayısıyla hedef analitin) miktarı ile doğru orantılıdır. |
| 6 | Absorpsiyon ölçümü (spektrofotometre) ile renk yoğunluğu belirlenir. |
| 7 | Standart eğri ile hedef analit konsantrasyonu hesaplanır. |
| Uygulama | Fonksiyon |
|---|---|
| ELISA (Enzim-Linked Immunosorbent Assay) | Hedef analitin tespiti ve miktar tayini; sinyal üretimi için HRP kullanılır |
| Western Blotting | Protein tespiti için kromojenik veya kemilüminesan substratlarla kullanım |
| Immunohistokimya (IHC) | Doku kesitlerinde antijen tespiti |
| Biyosensörler | H₂O₂ tayini için amperometrik biyosensörler |
| Klinik Kimya | Kan glukozu, kolesterol, ürik asit vb. tayinleri (enzimatik yöntemler) |
| Uygulama | Fonksiyon |
|---|---|
| Aroma Geliştirme | Fenolik bileşiklerin oksidasyonu ile karakteristik tat ve aroma oluşumu |
| Renk Stabilizasyonu | Gıdalarda istenmeyen oksidatif renk değişikliklerinin kontrolü |
| Oksidatif Reaksiyon Kontrolü | H₂O₂ giderme ve oksidatif bozunmanın düzenlenmesi |
| Patates ve Sebze İşleme | Enzimatik esmerleşme kontrolü |
| Uygulama | Fonksiyon |
|---|---|
| Boya Giderimi | Atık sulardaki boya maddelerinin oksidatif degradasyonu |
| Fenolik Bileşik Giderimi | Fenol ve türevlerinin oksidatif polimerizasyonu ve çöktürülmesi |
| Atık Su Arıtımı | Endüstriyel atık sulardaki toksik organik maddelerin giderimi |
| Uygulama | Fonksiyon |
|---|---|
| Biyosensör Geliştirme | H₂O₂ tayini için yüksek hassasiyetli biyosensörler |
| Enzim Konjugasyonu | Antikorlar, streptavidin vb. ile konjugasyon |
| Kemilüminesan | Kemilüminesan substratlar (luminol) ile yüksek hassasiyetli tespit |
| Organik Sentez | Seçici oksidasyon reaksiyonları |
| Uygulama | Önerilen Dozaj | Koşullar |
|---|---|---|
| ELISA | 1:1.000 – 1:10.000 (konjugat dilüsyonu) | pH 7.0-7.4, 25-37°C |
| Western Blot | 1:1.000 – 1:5.000 (konjugat dilüsyonu) | pH 7.0-7.4, 25°C |
| Immunohistokimya | 1:100 – 1:500 (konjugat dilüsyonu) | pH 7.0-7.4, 25-37°C |
| Gıda İşleme | 0.001 – 0.01% (ürün bazında) | pH 5.0-7.0, 20-40°C |
| Biyosensör | Uygulamaya bağlı olarak değişir | pH 7.0, 25°C |
Not: Dozaj, her spesifik uygulama için deneme çalışmaları ile optimize edilmelidir. ELISA ve diğer diagnostik uygulamalarda optimum konjugat dilüsyonu, titrasyon deneyleri ile belirlenmelidir.
| Parametre | Öneri |
|---|---|
| Dilüsyon Tamponu | PBS (Phosphate Buffered Saline), pH 7.0-7.4 + BSA (%0.1-1.0) |
| Substrat Hazırlama | TMB veya ABTS, üretici talimatlarına göre hazırlanmalıdır |
| Reaksiyon Süresi | 5-30 dakika (oda sıcaklığında) |
| Reaksiyon Durdurma | 1-2 M H₂SO₄ (TMB için) veya SDS çözeltisi |
| Sıcaklık | Oda sıcaklığı (20-25°C) veya 37°C (inkübatör) |
| Inaktivasyon | >60°C'de inaktive olur; asit veya baz ile de inaktivasyon mümkündür |
| Faktör | Etki |
|---|---|
| Sıcaklık | Optimum 30-40°C; 50°C üzerinde aktivite azalır; >60°C inaktivasyon |
| pH | Optimum pH 5.0-7.0; pH 4.0-9.0'da önemli aktivite |
| Substrat Konsantrasyonu | H₂O₂ yüksek konsantrasyonda enzim inhibisyonuna neden olabilir |
| İnhibitörler | Sodyum azid (NaN₃), ağır metaller, sülfürlü bileşikler, detajanlar |
| Tampon İyonları | Farklı tampon sistemleri aktiviteyi etkileyebilir |
| Iyonik Güç | Yüksek iyonik güç aktiviteyi azaltabilir |
| Protein Stabilizatörleri | BSA, gliserol, sükroz stabiliteyi artırır |
| Parametre | Değer |
|---|---|
| Akut Oral Toksisite (LD50, Sıçan) | > 2.000 mg/kg (düşük toksisite) |
| Akut Dermal Toksisite | Düşük |
| Akut İnhalasyon Toksisitesi | Toz formu solunum hassasiyetine yol açabilir |
| Cilt Tahrişi | Hafif tahriş edici |
| Göz Tahrişi | Hafif tahrişe neden olabilir |
| Cilt Duyarlılığı | Hassas bireylerde duyarlılığa neden olabilir (protein bazlı) |
| Mutajenite | Negatif (Ames testi) |
| Karsinojenite | Karsinojen olarak sınıflandırılmamıştır |
| Reprodüktif Toksisite | Reprodüktif toksin olarak sınıflandırılmamıştır |
| Alerjenite | Hassas bireylerde alerjik reaksiyonlara neden olabilir (protein bazlı) |
| Tehlike Sınıfı | Kategori | H-İfadesi |
|---|---|---|
| Solunum Duyarlılığı | Kategori 1 | H334 |
| Cilt Duyarlılığı | Kategori 1 | H317 |
| Su Tehlikesi (WGK Almanya) | 3 (su için ciddi tehlike) | - |
Sinyal Kelimesi: UYARI
Tehlike Piktogramları: GHS07 (Ünlem İşareti), GHS08 (Sağlık)
Tehlike İfadeleri (H-Kodları):
| Kod | İfade |
|---|---|
| H317 | Alerjik cilt reaksiyonuna neden olabilir. |
| H334 | Solunması halinde alerji veya astım semptomlarına veya nefes almada zorluğa neden olabilir. |
| Kod | İfade |
|---|---|
| P261 | Tozu/dumanı/gazı/sisini/buharını/spreyini solumaktan kaçının. |
| P264 | Elle muameleden sonra iyice yıkayın. |
| P271 | Sadece açık havada veya iyi havalandırılan bir alanda kullanın. |
| P280 | Koruyucu eldiven/koruyucu giysi/göz koruması/yüz koruması kullanın. |
| P302+P352 | CİLDE TEMAS EDERSE: Bol sabun ve su ile yıkayın. |
| P304+P340 | SOLUNURSA: Kişiyi temiz havaya çıkarın ve rahat nefes alması için uygun pozisyonda tutun. |
| P305+P351+P338 | GÖZE TEMAS EDERSE: Su ile birkaç dakika dikkatlice durulayın. Varsa kontakt lensleri çıkarın. |
| P342+P311 | Solunum semptomları yaşanırsa: ZEHİR MERKEZİ/doktoru arayın. |
| P333+P313 | Cilt tahrişi veya döküntü oluşursa: Tıbbi yardım alın. |
| P337+P313 | Göz tahrişi devam ederse: Tıbbi yardım alın. |
| P362+P364 | Kirlenmiş giysileri çıkarın ve yeniden kullanmadan önce yıkayın. |
| P501 | İçeriği/kabı yerel yönetmeliklere uygun olarak bertaraf edin. |
| Maruziyet Yolu | Yapılacak İşlem |
|---|---|
| Solunum | Temiz havaya çıkarın. Solunum tahrişi devam ederse tıbbi yardım alın. |
| Cilt Teması | Bol sabun ve su ile yıkayın. Kirlenmiş giysileri çıkarın. Tahriş devam ederse doktora danışın. |
| Göz Teması | En az 15 dakika boyunca bol su ile iyice durulayın. Kontakt lensleri çıkarın. Tahriş devam ederse tıbbi yardım alın. |
| Yutma | Ağzı su ile çalkalayın. Bol su için. Kusturmayın. Büyük miktarda yutulduysa tıbbi yardım alın. |
| Parametre | Bilgi |
|---|---|
| Yangın Tehlikesi | Yanıcı organik toz; yüksek sıcaklıklarda yanabilir. |
| Yangın Sırasındaki Tehlikeler | Termal bozunma, karbon monoksit, karbon dioksit ve azot oksitler dahil olmak üzere toksik dumanlar üretir. |
| Uygun Söndürme Malzemeleri | Su spreyi, CO₂, kuru kimyasal toz, alkole dayanıklı köpük. |
| Özel Koruyucu Ekipman | Kendinden kontrollü solunum cihazı (SCBA), tam koruyucu kıyafet. |
| Parametre | Bilgi |
|---|---|
| Kişisel Koruma | Toz maskesi, koruyucu gözlük, eldiven, tulum. |
| Havalandırma | Havalandırmayı artırın; kapalı alanlarda lokal egzoz kullanın. |
| Muhafaza | Toz dağılımını önlemek için dökülen alanı örtün. |
| Temizleme Yöntemleri | Vakum veya dikkatli süpürme ile kuru olarak toplayın. Su ile yıkamaktan kaçının (çözünür). |
| Çevresel Önlemler | Drenajlara, kanalizasyonlara ve su kaynaklarına girişini önleyin. |
| Atık Bertarafı | Yerel yönetmeliklere uygun olarak bertaraf edin. |
| Parametre | Bilgi |
|---|---|
| Depolama Koşulları | 2-8°C'de (uzun süreli) veya -20°C'de (çok uzun süreli) serin ve kuru ortamda saklayın. |
| Kısa Süreli Depolama | 2-8°C'de birkaç hafta (çözelti halinde, BSA ile stabilize edilmiş) |
| Uzun Süreli Depolama | -20°C önerilir (toz formda yıllarca stabil) |
| Kap Gereksinimleri | Orijinal ambalajında sıkıca kapalı tutun. Nemden ve doğrudan güneş ışığından koruyun. |
| Kaçınılacak Maddeler | Güçlü oksitleyiciler, yüksek ısı, nem, sodyum azid (inhibitör) |
| Raf Ömrü | 12 ay (uygun depolama altında açılmamış orijinal ambalajında) |
| Stabilite Notu | 4-8°C'de saklandığında 12 ay stabil; -20°C'de çok daha uzun süre stabil kalır. Çözelti halinde BSA ve gliserol ile stabilite artırılabilir. |
| Ambalaj Seçenekleri | Alüminyum folyo torbalar, plastik kaplar, vakumlu ambalaj. |
| Ambalaj Türü | Miktar | Malzeme |
|---|---|---|
| Alüminyum Folyo Torba | 1 g, 5 g, 10 g | Lamine alüminyum (azot atmosferinde) |
| Plastik Kap | 1 g, 5 g, 10 g | HDPE / Gıda sınıfı plastik |
| Cam Şişe | 1 g, 5 g, 10 g | Amber cam (ışıktan koruma) |
| Parametre | Bilgi |
|---|---|
| UN Numarası | Uygulanamaz (tehlikeli madde olarak sınıflandırılmamıştır) |
| Tehlike Sınıfı | Nakliye için tehlikeli olarak sınıflandırılmamıştır |
| Ambalaj Grubu | Uygulanamaz |
| ADR/RID | Düzenlenmemiştir |
| IMDG Kodu | Düzenlenmemiştir |
| IATA (Hava) | Düzenlenmemiştir |
| Deniz Kirletici | Hayır |
| Nakliye Sıcaklığı | Soğuk zincir (2-8°C) veya oda sıcaklığı (ürün formuna bağlı); nemden koruyun. |
| Bölge / Otorite | Durum |
|---|---|
| Avrupa Birliği | Gıda enzimi olarak onaylanmıştır (AB 1332/2008). |
| ABD (FDA) | Gıda uygulamaları için GRAS (Genel Olarak Güvenli Kabul Edilir). |
| Türkiye | Gıda işleme yardımcısı olarak onaylanmıştır (Türk Gıda Kodeksi). |
| EFSA | Yeniden değerlendirilmiş ve mevcut kullanım seviyelerinde güvenli bulunmuştur. |
| Koşer/Halal | Talep üzerine sertifikalandırılabilir (kaynağa bağlı olarak). |
| WGK Almanya | 3 (su için ciddi tehlike) |
| Parametre | Bilgi |
|---|---|
| Suda Yaşayan Toksisite | Suda yaşayan organizmalar için düşük toksisite. |
| Biyobozunurluk | Kolayca biyobozunur (protein bazlı). |
| Biyobirikim | Beklenmez. |
| Su Tehlike Sınıfı (WGK Almanya) | 3 (su için ciddi tehlike). |
| Atık Bertarafı | Yerel yönetmeliklere uygun olarak bertaraf edin. Kontamine malzemeler için yakma önerilir. |
| CAS Numarası | Enzim | Açıklama |
|---|---|---|
| 9003-99-0 | Peroksidaz (HRP) | Bu CAS numarası, yaban turpu peroksidazı (Horseradish Peroxidase) için kullanılır. |
| 9001-05-2 | Katalaz | Bu farklı bir enzimdir (EC 1.11.1.6); peroksidaz ile karıştırılmamalıdır. |
Önemli Not: Katalaz (CAS 9001-05-2) ile peroksidaz (CAS 9003-99-0) farklı enzimlerdir.
Katalaz (EC 1.11.1.6): H₂O₂'yi su ve oksijene parçalar (2H₂O₂ → 2H₂O + O₂)
Peroksidaz (EC 1.11.1.7): H₂O₂'yi kullanarak organik substratları okside eder (H₂O₂ + AH₂ → 2H₂O + A)
Tedarikçinin SDS'sinde doğru CAS numarasını ve EC numarasını doğrulayın.
| Özellik | Peroksidaz (HRP) | Katalaz | Glukoz Oksidaz | Lakaz |
|---|---|---|---|---|
| Enzim Sınıfı | Oksidoredüktaz | Oksidoredüktaz | Oksidoredüktaz | Oksidoredüktaz |
| EC Numarası | 1.11.1.7 | 1.11.1.6 | 1.1.3.4 | 1.10.3.2 |
| Kofaktör | Hem (Fe) | Hem (Fe) | FAD | Cu |
| Substrat | H₂O₂ + AH₂ | H₂O₂ | Glukoz + O₂ | Fenoller + O₂ |
| Reaksiyon | H₂O₂ + AH₂ → 2H₂O + A | 2H₂O₂ → 2H₂O + O₂ | Glukoz → Glukonik Asit | Fenoller → Kinonlar |
| Optimum pH | 5.0-7.0 | 7.0-8.0 | 5.5-7.0 | 4.0-6.0 |
| Optimum Sıcaklık | 30-40°C | 20-30°C | 30-40°C | 25-55°C |
| Birincil Uygulama | ELISA, biyosensör | H₂O₂ giderme | Biyosensör | Doku, kağıt |
S1: Peroksidaz (HRP) nedir ve ne işe yarar?
C: Peroksidaz (Horseradish Peroxidase), H₂O₂ ve çeşitli elektron donörleri arasındaki oksidasyon reaksiyonlarını katalize eden bir oksidoredüktaz enzimidir. En yaygın kullanım alanı ELISA testlerinde sinyal üretimidir. Ayrıca gıda endüstrisinde aroma ve renk kontrolü, biyosensörlerde H₂O₂ tayini ve çevre teknolojilerinde kullanılır.
S2: Peroksidaz ile katalaz arasındaki fark nedir?
C: Peroksidaz (CAS 9003-99-0, EC 1.11.1.7), H₂O₂'yi kullanarak organik substratları okside eder (H₂O₂ + AH₂ → 2H₂O + A). Katalaz (CAS 9001-05-2, EC 1.11.1.6) ise H₂O₂'yi su ve oksijene parçalar (2H₂O₂ → 2H₂O + O₂). Farklı enzimlerdir ve farklı uygulamalara sahiptirler.
S3: Peroksidazın optimum pH ve sıcaklığı nedir?
C: Optimum pH 5.0-7.0 ve optimum sıcaklık 30-40°C'dir. Enzim 60°C'nin üzerinde inaktive olur. ELISA gibi diagnostik uygulamalarda genellikle pH 7.0-7.4'te ve oda sıcaklığında veya 37°C'de kullanılır.
S4: Peroksidaz güvenli midir?
C: Evet. Peroksidaz, gıda uygulamaları için güvenli kabul edilir. Bununla birlikte, toz formu hassas bireylerde solunum veya cilt duyarlılığına neden olabilir. Toz formu solunmaktan kaçınılmalı; göz ve ciltle temasta su ile yıkanmalıdır.
S5: Peroksidaz nasıl saklanmalıdır?
C: 2-8°C'de (uzun süreli) veya -20°C'de (çok uzun süreli) saklayın. Çözelti halinde BSA ve gliserol ile stabilize edilebilir. Serin, kuru ve ışıktan korunmuş ortamda, orijinal ambalajında sıkıca kapalı tutun. 4-8°C'de saklandığında 12 ay stabildir.
S6: ELISA testinde HRP nasıl çalışır?
C: ELISA'da HRP, bir antikora veya streptavidine konjuge edilir. Substrat çözeltisi (H₂O₂ + TMB/ABTS) eklendiğinde, HRP substratı okside ederek renkli bir ürün oluşturur. Oluşan renk yoğunluğu, hedef analit miktarı ile doğru orantılıdır. Renk, spektrofotometre ile ölçülür ve standart eğri ile konsantrasyon hesaplanır.
S7: Peroksidazın CAS numarası nedir?
C: Yaban turpu peroksidazı (HRP) için CAS numarası 9003-99-0'dır. Katalaz (CAS 9001-05-2) farklı bir enzimdir ve peroksidaz ile karıştırılmamalıdır. Tedarikçinin SDS'sinde doğru CAS numarasını doğrulayın.
S8: Peroksidazın aktivitesini ne inhibe eder?
C: Sodyum azid (NaN₃), ağır metaller (Cu²⁺, Hg²⁺, Pb²⁺), sülfürlü bileşikler, yüksek konsantrasyonda EDTA ve detajanlar (SDS) peroksidaz aktivitesini inhibe eder. Ayrıca yüksek H₂O₂ konsantrasyonu da enzim inhibisyonuna neden olabilir.
| Özellik | Değer |
|---|---|
| CAS Numarası | 9003-99-0 |
| EC Numarası | 1.11.1.7 |
| Enzim Sınıfı | Oksidoredüktaz |
| Kofaktör | Hem grubu (Fe-protoporfirin IX) |
| Moleküler Ağırlık | ~44 kDa |
| Görünüm | Kahverengimsi ila yeşilimsi kahverengi toz veya sıvı |
| Çözünürlük | Suda çözünür |
| Optimum pH | 5.0 – 7.0 |
| Optimum Sıcaklık | 30 – 40°C |
| Inaktivasyon Sıcaklığı | >60°C |
| Substrat | H₂O₂ + elektron donörleri (ABTS, TMB, DAB, fenoller vb.) |
| Birincil Kullanımlar | ELISA, Western blot, immunohistokimya, biyosensör, gıda işleme, çevre teknolojileri |
| Raf Ömrü | 12 ay (2-8°C'de, uygun depolamada) |
| UN Numarası | Uygulanamaz |
| GHS Sinyal Kelimesi | UYARI |
| WGK Almanya | 3 (su için ciddi tehlike) |
CAS Numarası Doğrulaması: Peroksidaz için CAS numarası 9003-99-0'dır. Katalaz (CAS 9001-05-2) farklı bir enzimdir ve peroksidaz ile karıştırılmamalıdır. Katalaz H₂O₂'yi su + oksijene parçalarken, peroksidaz H₂O₂'yi kullanarak organik substratları okside eder. Tedarikçinin SDS'sinde doğru CAS numarasını ve EC numarasını doğrulayın.
Solunum Duyarlılığı: Peroksidaz tozu, duyarlı bireylerde solunum duyarlılığına (H334) neden olabilir. Uygun toz kontrol önlemleri ve solunum koruması kullanın. Toz formu solunmaktan kaçınılmalıdır.
Cilt Duyarlılığı: Hassas bireylerde alerjik cilt reaksiyonlarına (H317) neden olabilir. Koruyucu eldiven kullanın. Göz ve ciltle temasta su ile yıkayın.
Sıcaklık Hassasiyeti: Peroksidaz ısıya duyarlıdır. 60°C'nin üzerinde inaktive olur. İşleme ve depolama sıcaklıklarına dikkat edilmelidir.
Sodyum Azid (NaN₃) İnhibisyonu: Sodyum azid, peroksidazın güçlü bir inhibitörüdür. Depolama tamponlarında veya çalışma çözeltilerinde sodyum azid kullanılmamalıdır.
Işık Hassasiyeti: Peroksidaz çözeltileri ışığa duyarlıdır. Işıktan korunmalıdır.
Substrat Seçimi: Farklı substratlar (TMB, ABTS, OPD, DAB) farklı hassasiyet ve dalga boylarında ölçüm sağlar. Uygulamaya uygun substrat seçilmelidir.
Dozaj Optimizasyonu: ELISA ve diğer diagnostik uygulamalarda optimum konjugat dilüsyonu, titrasyon deneyleri ile belirlenmelidir.
Depolama: 2-8°C'de (uzun süreli) veya -20°C'de (çok uzun süreli) saklayın. Toz formu kuru tutun. Orijinal ambalajında sıkıca kapalı muhafaza edin. Nemden ve doğrudan güneş ışığından koruyun. Çözelti halinde BSA (%0.1-1.0) ve gliserol (%30-50) ile stabilite artırılabilir.
Kullanım: Toz maskesi, koruyucu eldiven ve gözlük kullanın. Toz oluşumundan kaçının. Yeterli havalandırmayı sağlayın. Sodyum azid içermeyen tamponlar kullanın.
ELISA Uygulaması: Konjugatı PBS (pH 7.0-7.4) + BSA (%0.1-1.0) ile seyreltin. TMB veya ABTS substratını kullanın. Reaksiyon süresi 5-30 dakika. Reaksiyonu 1-2 M H₂SO₄ veya SDS ile durdurun. Absorpsiyonu uygun dalga boyunda ölçün.
Gıda Uygulaması: pH 5.0-7.0, sıcaklık 20-40°C'de kullanın. Kontrollü oksidasyon sağlayın.
Kalite Kontrol: Enzim aktivitesini düzenli olarak izleyin. RZ (Reinheitszahl) değeri (A₄₀₃/A₂₇₅) saflık göstergesidir.
Atık Yönetimi: Atıkları yerel yönetmeliklere uygun olarak bertaraf edin. Su kaynaklarına boşaltmayın.
Çevre Koruma: WGK 3 sınıflandırması nedeniyle, drenajlara, kanalizasyonlara ve su kaynaklarına girişini önleyin.
Bu Teknik Veri Sayfası (TDS) yalnızca bilgilendirme amaçlıdır ve mevcut teknik verilere dayanarak hazırlanmıştır. Kullanıcı, ürünün kendi spesifik uygulamaları için uygunluğunu belirleme ve tüm yerel, ulusal ve uluslararası düzenlemelere uyma konusunda tek başına sorumludur. Tam güvenlik, depolama, kullanım, nakliye, atık ve düzenleyici uyumluluk bilgileri için üretici/tedarikçi tarafından sağlanan resmi Güvenlik Bilgi Formu'na (SDS/MSDS) başvurulmalıdır. Bu belge profesyonel tavsiyenin yerini tutmaz. Dozaj ve uygulama koşulları, ürüne özel denemelerle optimize edilmelidir. Peroksidazın CAS numarası 9003-99-0'dır. Katalaz (CAS 9001-05-2) farklı bir enzimdir; peroksidaz ile karıştırılmamalıdır. Doğru CAS numarası ve EC numarası tedarikçinin SDS'sinde doğrulanmalıdır.